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當您選擇毛細管色譜柱的時候,需要考慮以下四點基本要素:
1)固定相
2)內(nèi)徑
3)柱長度
4)膜厚
1)固定相
◆在滿足您的分離要求的情況下,盡可能選擇極性小的毛細柱;
◆非極性固定相主要是根據(jù)被分析物的沸點不同,來達到分離的目的;
◆隨著固定相主架上氰基、苯基數(shù)量的增加,固定相的極性增加,偶極矩或電荷分布上的差異對分離結(jié)果的影響加大(AC10/BP10、BPX35, BPX50、AC225/BP225和BPX70);
◆對于可以產(chǎn)生氫鍵作用的化合物(如醛類、醇類),聚乙二醇的固定相是選擇:SOLGEL-WAX、AC20/BP20(WAX)和BP21(FFAP);
2)內(nèi)徑
◆內(nèi)徑越小則柱效越高,因此分離度越好??焖偕V柱(0.1mm內(nèi)徑)被用于快速分析,因為同樣的柱效可以在更短的時間內(nèi)得到。
如上圖內(nèi)徑的影響[多環(huán)芳烴(PAH)分析]
3)柱長
◆通常在能夠達到應用所需分離度的前提下盡量選擇短的柱長。如果選用大柱長而混合樣品的分離度仍然不夠,那么可以嘗試改變固定相或者內(nèi)徑。
◆分離度與柱效的平方根成正比,因此,柱長加倍只能使得柱子的分辨能力增加大約40%。
如上圖柱長的影響
4)膜厚
◆樣品分析物在固定相中溶解性存在差異時,推薦選用膜較厚的色譜柱,可減少柱過載現(xiàn)象和化合物之間相互作用共同洗脫現(xiàn)象的發(fā)生。如果兩種被分析物能*分離開、共同洗脫不太可能時,即使組分含量差別很大,也可以選擇薄膜色譜柱。
如上圖膜厚的影響
◆根據(jù)相比β 值,我們可以對色譜柱加以分類,以針對非常適合的應用。 相比 β 值越小,即膜越厚或者內(nèi)徑越小,色譜柱更適合分析揮發(fā)性有機物。膜薄的色譜柱相比β 值高,更適合分析分子量大的化合物。
◆通過相比的選擇,在更換內(nèi)徑或膜厚不同的色譜柱時,選擇相比β 值固定,就可以得到相同的分析結(jié)果,而不需要更改分析方法。
相比β值
膜厚(μm) | 柱內(nèi)徑0.1mm | 柱內(nèi)徑0.15mm | 柱內(nèi)徑0.22mm | 柱內(nèi)徑0.25mm | 柱內(nèi)徑0.32mm | 柱內(nèi)徑0.53mm |
0.1 | 250 | 一 | 550 | 625 | 800 | 1325 |
0.15 | 一 | 250 | 一 | 一 | 一 | 883 |
0.25 | 一 | 150 | 220 | 250 | 320 | 530 |
0.5 | 一 | 75 | 110 | 125 | 160 | 265 |
1 | 一 | 一 | 55 | 63 | 80 | 132 |
3 | 一 | 一 | 一 | 一 | 27 | 44 |
5 | 一 | 一 | 一 | 一 | 16 | 26 |
如上表:SGE公司毛細管色譜柱的相比β值。 當色譜柱內(nèi)徑發(fā)生改變時,保持相比β值基本相同,就可以確保您的分析結(jié)果,不需要再改變分析方法。